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RTS 克隆感受态细胞

产品编号 产?#35775;?#31216; 规格 价格(元) 说明书
K1001 RTS DH5a感受态细胞 24支 600
K1002 RTS DH10B感受态细胞 24支 600
K1003 RTS Turbo感受态细胞 24支 600
RTS(Room Temperature Stable)系列感受态细胞为HaiGene独有的化学感受态专利技术制备,其室温可保存7天、-20°C可保存2年(推荐保存温度)、-80°C可长期保存性能无下降。运输过程中无需干冰,可常规冰袋运输(推荐运输温度)。RTS克隆感受态细胞均为热激感受态细胞,专用于TA/平端/酶切连接的载体构建(不可用于无缝克隆载体构建),经42°C热激1min可获得106~108cfu/μg效价, 该系列感受态细胞使用简单、运输、储存方便。

组分

组分名称 数量
RTS Competent Cell 24支
Nano E.coli Transfection Reagent 0.6 ml×2

应用

质粒转化、DNA克隆、DNA测序

储存

室温可保存7日,-20°C可保存2年。

操作方法

1. 从-20°C冰箱中取出Nano E.coli Transfection Reagent彻底融化,放置于冰上。
注意:该试剂含长链带电化合物,允许反复冻融20次,使用完毕后继续-20°C保存。
2. 取50 μl Nano E.coli Transfection Reagent置于0.2ml EP管中,加入1~10 μl连接产物或质粒DNA,枪头吹打混合均匀,冰上放置2min。
注意:放置时间不要超过30min,过长时间会导致核酸聚合,从而影响转化效价。
3. 将上述混合物(50 μl Nano E.coli Transfection Reagent和质粒DNA)加入到一支RTS表达感受态细胞干粉中,吸头轻轻吹打,彻底溶解细胞干粉,置于冰上15min。
注意:使用RTS 表达感受态细胞干粉前,轻甩干粉至管底部,如果发现干粉已经溶解则不可使用。
4. 置于42°C热激1min后,迅速置于冰上急冷2min。
5. 将热激完?#31995;?#24863;受态细胞转移到含有450 μl不含抗生素的SOC(或LB)培养基,37°C振荡(225 rpm)培养60min。使质粒上抗性标记基因表达,菌体复苏。
6. 取200 μl复?#31449;和?#24067;到含相应抗生素的LB琼脂平板表面。 7. 将平板置于37°C培养,12~18小时后可出现菌落。
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