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RTS 表达感受态细胞

产品编号 产?#35775;?#31216; 规格 价格(元) 说明书
K0003 RTS BL21(DE3) Chaprone感受态细胞 16支 800
K0004 RTS Arctic(DE3)感受态细胞 16支 500
K0005 RTS BL21(DE3)plysS感受态细胞 16支 500
K0006 RTS Rosetta2(DE3)感受态细胞 16支 500
K0007 RTS OrigamiB(DE3)感受态细胞 16支 500
K0008 RTS BL21-Codonplus-RIPL 感受态细胞 16支 500
K0009 RTS SHuffle T7 E.coli 感受态细胞 16支 500
K0010 RTS BL21(DE3)感受态细胞 16支 500
RTS(Room Temperature Stable)系列感受态细胞为HaiGene独有的化学感受态专利技术制备,其室温可保存7天、-20°C可保存2年(推荐保存温度)、-80°C可长期保存性能无下降。运输过程中无需干冰,可常规冰袋运输(推荐运输温度)。RTS表达感受态细胞均为热激感受态细胞,转用于蛋白表达(不可用于克隆和载体构建),经42°C热激1min可获得105~106cfu/μg效价,可满足质粒转化要求。该制品使用简单、运输、储存方便。

组分

组分名称 数量
RTS Competent Cell 16支
Nano E.coli Transfection Reagent 0.6 ml×2

储存

RTS系列感受态均可室温保存7天,长期保存-20°C(2年)。

使用方法

1. 从-20°C冰箱中取出Nano E.coli Transfection Reagent彻底融化,放置于冰上。
注意:该试剂含长链带电化合物,允许反复冻融20次,使用完毕后继续-20°C保存。
2. 取50 μl Nano E.coli Transfection Reagent置于0.2 ml EP管中,加入10~100 ng质粒DNA(不可使用连接产物),枪头吹打混合均匀,冰上放置2min。
注意:放置时间不要超过30min,过长时间会导致核酸聚合,从而影响转化效价。
3. 将上述混合物(50 μl Nano E.coli Transfection Reagent和质粒DNA)加入到一支RTS表达感受态细胞干粉中,枪头轻轻吹打,彻底溶解细胞干粉,置于冰上15min。
注意:使用RTS 表达感受态细胞干粉前,轻甩干粉至管底部,如果发现干粉已经溶解则不可使用。
4. 置于42°C热激1min后,迅速置于冰上急冷2min。
5. 将热激完毕的感受态细胞转移到含有450 μl不含抗生素的SOC(或LB)培养基,37°C振荡(225 rpm)培养60min。使质粒上抗性标记基因表达,菌体复苏。
6. 取200 μl复?#31449;和?#24067;到含相应抗生素的LB琼脂平板表面。
7. 将平板置于37°C培养,12~18小时后可出现菌落。
8. 获得的表达菌,可使用IPTG进行诱导表达,从而获得重组蛋白。

 
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